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您當(dāng)前的位置：首頁 > 技術(shù)服務(wù) > 分子生物學(xué)平臺(tái) > miRNA熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)

  Real-time miRNA是小的非編碼RNAs，通過選擇性的與互補(bǔ)的mRNA或3' UTL序列結(jié)合控制著轉(zhuǎn)錄水平的基因表達(dá)。近30%哺乳動(dòng)物基因受小RNA分子的調(diào)控，從而調(diào)節(jié)各種生物功能，包括發(fā)育、細(xì)胞分化、增殖、凋亡、維持stemness和impriting。Northern blot是分析各種miRNAs常用的方法，但Northern blot分析的靈敏度低、通量差仍是其主要不足。實(shí)時(shí)定量PCR由于其靈敏度高、方便快速成為檢測(cè)的一個(gè)不錯(cuò)選擇。 
  由于成熟的miRNA僅為21-23nt，不能通過傳統(tǒng)方法進(jìn)行發(fā)轉(zhuǎn)錄，進(jìn)而進(jìn)行定量。信諾金達(dá)采用miRNA加尾方法反轉(zhuǎn)錄miRNA，然后進(jìn)行miRNA定量（見下圖）。

miRNA熒光定量PCR服務(wù)要求

  需提供新鮮或者保存完好的細(xì)胞（至少5×10的6次方）、組織(100mg)、血液(300μl)等樣本材料；或純化好的總RNA（OD260/OD280在1.9-2.1之間，完整性好）； 同時(shí)提供待測(cè)miRNA序列或登錄號(hào)。

miRNA熒光定量PCR服務(wù)報(bào)告內(nèi)容

  miRNA（或總RNA）濃度，電泳圖片，擴(kuò)增曲線，熔解曲線，Ct值以及數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析（可選），實(shí)驗(yàn)報(bào)告以及剩余引物和模板（信諾金達(dá)可保存1個(gè)月）