Southern Blot
Southern印跡雜交(Southern blot)是1975年由英國人southern創建,是研究DNA圖譜的基本技術。Southern印跡雜交(Southern blot)是進行基因組DNA特定序列定位的通用方法。一般利用瓊脂糖凝膠電泳分離經限制性內切酶消化的DNA片段,將膠上的DNA變性并在原位將單鏈DNA片段轉移至尼龍膜或其他固相支持物上,經干烤或者紫外線照射固定,再與相對應結構的標記探針進行雜交,用放射自顯影或酶反應顯色,從而檢測特定DNA分子的含量。信諾金達提供DIG標記的Southern Blot技術服務。
服務要求
1、待雜交目標基因序列和含有待雜交基因的陽性質粒,我們會依據Southern blot實驗要求重新選擇全長或部分區域作為探針序列,使用PCR法標記地高辛探針。
2、待雜交的高質量DNA樣品質量至關重要,決定實驗的成敗,請確保DNA抽提質量,盡量采用進口試劑盒提取或委托信諾金達提取。
A、基因組DNA檢測:OD260/OD280=1.8-2.0,濃度大于0.3μg/ul,雜交需模板DNA約60 μg/泳道/次;
B、請提供基因組DNA檢測圖片,要求無降解,無蛋白污染;
C、檢測樣品低溫運輸至公司。
3、客戶如果無法提供高品質的基因組DNA樣品,信諾金達可以幫助制備可用于Southern Blot檢測的DNA樣品,客戶提供樣品要求如下:
A、菌液:不低于500ul,冰袋或者干冰運輸
B、組織:總量不小于2g,干冰運輸
C、細胞:提供新鮮的細胞即可,盡量不要使用鹽溶液沖洗
4、請注明基因組DNA酶切方案,如果項目中需要用到非常規的限制性內切酶,需額外加收酶切費用或有客戶提供相應的限制性內切酶。
服務基本流程
1.基因組DNA提取(如果需要);
2.探針設計合成(如果需要);
3. DIG探針標記;
4. Southern雜交檢測;
5. 提交電子版檢測報告,包括詳細操作程序和實驗結果等。
Southern Blot服務交付文件
信諾金達負責對客戶提供樣品進行DIG探針標記與Southern雜交檢測技術服務,最終提供檢測報告及檢測圖片
1、DNA樣品檢測報告(實驗樣品不返還,請注意保留備份)
2、標準實驗流程報告
3、southern blot實驗結果檢測報告
4、如果是實驗有額外的要求,請提前致電或郵件說明
實驗范例圖片:

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