熒光定量PCR簡介
熒光定量PCR(qPCR)檢測就是在PCR擴(kuò)增過程中,通過熒光信號,對PCR進(jìn)程進(jìn)行實(shí)時(shí)檢測。由于在PCR擴(kuò)增的指數(shù)時(shí)期,模板的Ct值和該模板的起始拷貝數(shù)存在線性關(guān)系,所以成為定量的依據(jù)。由于熒光定量PCR的眾多優(yōu)點(diǎn),現(xiàn)在已經(jīng)是生命科學(xué)領(lǐng)域的一項(xiàng)重要技術(shù),并成為基因表達(dá)差異和文章發(fā)表不可或缺的部分。real-time qPCR輸出的數(shù)據(jù)不同于常規(guī)PCR電泳檢測,很多沒有做過于熒光定量PCR的研究者常常感到高深莫測,不知從何入手;甚至一些做過一些實(shí)驗(yàn)的研究者也會對數(shù)據(jù)處理分析感到迷惑。很多時(shí)候,盡管知曉熒光定量PCR的原理和基本操作,仍然浪費(fèi)時(shí)間和精力,而得不到好的結(jié)果或?qū)Υ罅康臄?shù)據(jù)不知所措。
信諾金達(dá)的熒光定量PCR(qPCR)技術(shù)服務(wù),根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康,設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案(相對定量或絕對定量;SYBR Green I或Taqman探針方法),用完全按照符合國際標(biāo)準(zhǔn)(MIQE)的熒光定量PCR(qPCR)試劑完成實(shí)驗(yàn),提供符合文章發(fā)表的客觀事實(shí)實(shí)驗(yàn)報(bào)告和原始數(shù)據(jù)。
服務(wù)要求
需提供新鮮或保存完好的細(xì)胞(至少5×10的6次方)、組織(至少50mg)、血液(300μl)等樣本材料;或純化好的總RNA(OD260/OD280在1.9-2.1之間,完整性好)或總DNA(OD260/OD280在1.7-1.9之間,完整性好);或反轉(zhuǎn)錄好的cDNA不少于30μl(反轉(zhuǎn)錄的總RNA完整性好,純度在1.9-2.1之間);
同時(shí)提供待測基因序列或登錄號。
報(bào)告內(nèi)容
實(shí)驗(yàn)報(bào)告部分組成
實(shí)驗(yàn)服務(wù)內(nèi)容
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