端粒檢測
端粒是位于真核生物染色體末端特殊DNA序列與特定蛋白質(zhì)形成的復(fù)合體,在細胞分裂過程中避免染色體的末端融合和錯誤降解,以維持染色體的結(jié)構(gòu)完整與穩(wěn)定。端粒DNA由大量簡單的串聯(lián)重復(fù)序列組成,由端粒酶合成,在個體的生長發(fā)育過程中會發(fā)生長度改變、重復(fù)序列改變和重排等變化。
端粒長度是反映細胞狀態(tài)的一項重要指標(biāo),檢測端粒長度的方法有多種,其中Southern Blot是最常用的方法,Southern Blot操作簡便、成本較低,能很直觀的反應(yīng)端粒長度。信諾金達的Southern Blot平臺能為您提供****的端粒檢測服務(wù)。
服務(wù)要求
1、待雜交目標(biāo)基因序列和含有待雜交基因的陽性質(zhì)粒,我們會依據(jù)Southern blot實驗要求重新選擇全長或部分區(qū)域作為探針序列,使用PCR法標(biāo)記地高辛探針。
2、待雜交的高質(zhì)量DNA樣品質(zhì)量至關(guān)重要,決定實驗的成敗,請確保DNA抽提質(zhì)量,盡量采用進口試劑盒提取或委托信諾金達提取。
A、基因組DNA檢測:OD260/OD280=1.8-2.0,濃度大于0.3μg/ul,雜交需模板DNA約60 μg/泳道/次;
B、請?zhí)峁┗蚪MDNA檢測圖片,要求無降解,無蛋白污染;
C、檢測樣品低溫運輸至公司。
3、客戶如果無法提供高品質(zhì)的基因組DNA樣品,信諾金達可以幫助制備可用于Southern Blot檢測的DNA樣品,客戶提供樣品要求如下:
A、菌液:不低于500ul,冰袋或者干冰運輸
B、組織:總量不小于2g,干冰運輸
C、細胞:提供新鮮的細胞即可,盡量不要使用鹽溶液沖洗
4、請注明基因組DNA酶切方案,如果項目中需要用到非常規(guī)的限制性內(nèi)切酶,需額外加收酶切費用或有客戶提供相應(yīng)的限制性內(nèi)切酶。
端粒檢測實驗基本流程
1.基因組DNA提取
2.基因組DNA酶切消化
3.DNA限制酶切消化后產(chǎn)物
4.瓊脂糖凝膠電泳
5.轉(zhuǎn)膜
6.固定
7. DIG探針標(biāo)記;
8. Southern雜交;
8. 曝光顯色;
9. 提交電子版檢測報告,包括詳細操作程序和實驗結(jié)果等。
Southern Blot服務(wù)交付文件
信諾金達負責(zé)對客戶提供樣品進行DIG探針標(biāo)記與Southern雜交檢測技術(shù)服務(wù),最終提供檢測報告及檢測圖片
1、DNA樣品檢測報告(實驗樣品不返還,請注意保留備份)
2、標(biāo)準(zhǔn)實驗流程報告
3、southern blot實驗結(jié)果檢測報告
4、如果是實驗有額外的要求,請?zhí)崆爸码娀蜞]件說明
實驗范例圖片:

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